光片扫描显微镜不是简单成像的显微镜,而是可以用于在原子、分子尺度进行加工和操作的工具。扫描探针显微镜的应用领域是宽广的,无论是物理、化学、生物、医学等基础学科,还是材料、微电子等应用学科都有用武之地。
光片扫描显微镜的基本原理是基于量子隧道效应。当针尖和试样面间距离足够小时(<0.4nm),在针尖和试样面间施加一偏置电压,便会产生隧道效应,电子在针尖和试样面之间流动,形成隧道电流。
钙比率探针在溶液中均有荧光,测量时须洗去细胞外液探针,而进入细胞后的探针其AM被分解后不能透出质膜。由于这些探针要用紫外激发光作激发光源,会造成细胞的损伤,还会增加潜在的自发荧光,而且荧光发射峰波长也较短,须提高发光强度,因而其使用受到一定的限制。
膜电位荧光探针根据其对膜电位变化反应速度的快慢分为快、慢两类探针,各类均有10多种。DiBAC4(3)为常用的膜电位荧光探针,DiBAC4(3)为带负电荷的阴离子慢反应染料。该探针本身无荧光,当进入细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光,测量时要求细胞浸在荧光染料中。
细胞内活性氧基活性氧可影响细胞代谢,与蛋白质、核酸、脂类等发生反应,有些反应是有害的,因此测量活性氧在毒理学研究中有一定的意义。根据检测活性氧的不同可选择不同的荧光探针。
由于某些毒性物质尤其是促癌物可影响缝隙连接介导的物质运输,因此该方法也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在毒性的化学物质。